程颖：循环细胞在小细胞肺癌临床研究中的困难重重

周而复始细胞内( Circulating tumor cells，CTCs)作为一种可替代原发的“液体活检骨头”，已在白屑病乳卵巢癌、癌和结帕金森氏症中所用做高血压称赞。小细胞内心肌梗塞(Small celllung cancer，SCLC)有组织骨头来源不足，且缺少有效率的用到异常发作分散和样本研究高血压的生物体一个大。多达年研究课题者CTCs在SCLC中所的医习研究原理开展了揭示普遍性研究课题，见到CTCs对SCLC的病因、仍须，用到异常发作、分散，研究报告、高血压以及建立核心内容疗规设计方案等具有不可或缺本质，本文就CTCs在SCLC医习研究原理中所的研究课题进展为由综述。

一、SCLC患儿CTCs的扫描原理

CTCs的扫描原理主要有流式细胞内扫描技术技术开发( fluocytometry，FCM)、逆转录一聚合酶链反应会(reverse-transcriptionPCR，RT-PCR)、CellSearch系统设计、CTC芯片(CTC-chip)技术技术开发和膜滤过分离细胞内技术技术开发(isolation by size of epithelial tumor cells．ISET)等，其中所CellSearch系统设计因其半自动化的配置跨平台，较高的特异普遍性、诱发和可重复普遍性，成最不常研究原理的CTCs扫描原理。

要到在2004年，Allard等抢先研究原理CelISearch规扫描了99同上心肌梗塞（未有列举SCLC同上数）患儿的CTCs，随后Nagrath等运用做CTC-chip规扫描了55同上心肌梗塞患儿外周屑C TCs。2009年以后的研究课题多运用做CeIISearch规扫描SCI．C患儿外周屑CTCs，然而该原理由于对缺少上皮细胞内特质的细胞内会用到漏检有可能，且与免疫磁珠及免疫反应会联结的CTCs无规行某些后续的扫描，医习研究原理受到限于。

多达年，随着石墨烯科技的发展，载体CTCs表面一个大的特异普遍性辨识分f词句的石墨烯材料联结微流控技术技术开发的CTCs扫描跨平台的研究课题受到广为关注，2013年，《自然》（Nature）刊物将CTCs石墨烯扫描选为最具创新普遍性和产物发展前景的病因新原理，成果令人瞩目。但就目前来看，现有的CTCs扫描原理各有利弊，未有有研究课题得出结论哪种原理对SCLC的CTCs扫描更加有占优。着眼未有来，十分困难技术开发特异普遍性、诱发更加高的CTCs扫描技术技术开发，为SCLC的基础和医习研究课题助长突破。

二、CTCs在SCLC医习研究原理中所的研究课题现状

（一）CTCs计算与SCLC的病因、仍须

多达年多项研究课题显示CTCs计算水准与SCLC的病因、仍须有密切关系0 2009年Tanaka等研究原理CeIISearch规扫描了1 50同上7.5ml外周屑CTCs，其中所心肌梗塞1 25同上、非恶普遍性25同上，心肌梗塞患儿最主要116同上非小细胞内心肌梗塞(non-small cell lung cancer，NSCLC)和9同上SCLC。

研究课题%-SCLC患儿CTCs阳普遍性率为66.70-/0（6同上／9同上），突出少于NSCLC患儿的CTCs阳普遍性率(卵巢癌25.9%，鳞癌40.9%；卵巢癌对比SCLC，P

同年，Hou等研究原理CeIISearch规扫描了50同上初治的SCLC患儿外周屑CTCs，最主要20同上限于期SCLC (limited disease，LD-SCLC)患儿和30同上广为期SCLC(extensive disease，ED-SCLC)患儿，水平线期ED-SCLC及LD-SCLC患儿的中所位CTCs计算大致相同237和2个/7.5ml屑，7同上未有检出CTCs的患儿皆为LD-SCLC，推论CTCs计算水准与SCLC仍须相关。

相同的论据在2012年被日本习者Naito等得出结论，研究课题者在51同上SCLC患儿中所立用CeIISearch规扫描水平线期CTCs水准，%-ED-SCLC,患儿的中所位CTCs计算为9.5个f 7.5ml屑，而LD-SCLC仅为1个／7.51111屑，进一步推论ED-SCLC患儿的CTCs水准少于LD-SCLC患儿。

（二）CTCs研究报告SCLC的及高血压

CTCs是不是可作为研究报告SCLC和高血压的有救指f,匙研究课题者们一直在聚焦的疑虑。Houi等在2009年通过CellSearch规扫描了50同上SCLC患儿(LD-SCLC20同上，ED-SCLC30同上)的CTCs，见到CTCs>300个/7.5ml屑的患儿及CTCs

水平线期CTCs>=50和

在该研究课题中所SCLC患儿的高血压并不一定最大值来让8个/7.5ml屑，更加进一步将患儿总称CTCs>=8及

Hiltermann等在2012年同样研究原理CellSearch规扫描59同上SCLC患儿在水平线期、1短周期疗程后及4短周期疗程告一段落后外固屑CTCs水准，其中所ED-SCLC患儿38同上，LD-SCLC患儿2 1同上c水平线期有43同上患儿(730-/o)CTCs≥2个/7.5ml屑，CTCs>215个/7.5ml屑和CTCs

经过1短周期疗程后患儿CTCs水准突出降低，且1短周期疗程后CTCs

研究课题者推断CTCs水准是SCLC高血压的独立影响特异普遍性，其中所1短周期疗程后CTCs水准是SCLC和高血压最强的样本研究特异普遍性。

2013年ASCO发表的ECOG1508研究课题中所，研究课题者更加进一步在155同上ED-SCLC中所加入载体疗规，并对其中所123同上患儿水平线期CTCs开展扫描，%-载体疗规未有能延长ED-SCLC患儿的PFS和OS，但见到水平线期CTCs≤l00和CTCs>100个／7.5ml屑的mPFS大致相同4.4和4.3个年初（P=0.07），OS大致相同10.7和7.2个年初(P=0.01)。研究课题者认为虽然载体疗规没人能减少ED-SCLC患儿的PFS和OS，但却见到了CTCs有可能是SCLC患儿的高血压一个大。

最多达，Igawa等更加进一步研究原理OBP-401检验扫描SCLC患儿外周屑CTCso研究原理OBP-401检验扫描乳卵巢癌和胃癌患儿CTCs的相关研究课题已有后半期报道。研究课题纳入30同上韧治的SCLC患儿，29同上患儿(96%)外周屑CTCs阳普遍性。在水平线期，21同上患儿CTCs

（三）CTCs用到异常SCLC的发作和分散

现有的研究课题表明通过扫描CTCs的用到来用到异常SCLC的发作和分散具有不可或缺的医习本质o Tanaka等研究课题见到CTCs水准‘j 125同上心肌梗塞患儿（最主要9同上SCLC患儿）进展突出相关，特别是与高处分散密切（AUC-ROC 0,873 p

基于这些样本，著者认为CTCs可作为用到异常心肌梗塞高处分散的生物体标记物。Natio等研究课题见到SCLC在水平线期、疗规告一段落后及发作后CTCs的阳普遍性率大致相同68.6%、26.5%和67.6，提醒SCLC发作后外周习CTCs水准上升，起因高处分散脏器的数为0、1和>=2的患儿其中所位CTCs计算大致相同2.0、7.5和21个/7.5ml屑,提醒CTCs水准与高处分散脏器的数有关，高处分散越远多，CTCs计算越远高（p

三、CTCs在SCLC医习研究原理中所的揭示朝向

发作和分散是导致患儿疗规最终和死亡的主要理由，立刻见到的发作和分散并采敢务实有效率的疗规措施可突出减少患儿穴居率。然而，由于SCLC缺少必须用到异常发作和分散的生物体一个大，且不除此以外医习影像检验无规见到微分散灶及微小受到破坏软组织，导致起因发作和分散的SCLC患儿不能立刻接受病因和疗规。

医习中所部分LD-SCLC的患儿高血压相同之处较大，提醒有些限于期的患儿在病因时有可能已起因了医习影像不能见到的微分散而成潜在的广为期患儿。通过扫描外周屑CTCs的用到及数转变从而对SCLC患儿体内状态开展实时、一个系统设计地用到异常和称赞，立刻见到的发作、分散，将有助医习心理医生对疗规良机的把握和疗规作法的为了让，但是否是CTCs的数或转变最大值为多少时必须正确地反映SCLC的发作或分散尚为不清楚，必需要更加多的循证医习证据为由支持。

CTCs在研究报告SCLC患儿疗规总体的研究原理尚为处于揭示下一阶段，疗规全过程中所CTCs数的转变与SCLC患儿疗程的连续普遍性及其与SCLC患儿放疗良机的为了让等疑虑在未有来必需大量的医习研究课题。多达5年，对CTCs是不是可作为SCLC患儿高血压指标的研究课题随之增多，但SCLC最佳的高血压CTCs并不一定最大值尚为无定论，争议极多。

其中所3项来自Hou、Naito、Hiltermann的研究课题将SCLC的高血压CTCs佢定最大值分别来让为50、8和2个／7.5ml屑，相同之处很大，这有可能与研究课题运用做的统计习原理不尽相同以及入组样本量较少有关。多达期意大利习者Normanno等主张将ED-SCLC和LD-SCLC患儿分开研究课题，对水平线期、l短周期疗程后CTCs以及疗规前后CTCs的转变最大值分别来让高血压并不一定最大值，为未有来的研究课题给予了一新基本概念。笔者所在的科研团队也正己任今后SCLC患儿高血压最佳CTCs并不一定最大值的研究课题，结果令人希望。

的核心内容疗规是疗规模式的发展朝向。SCLC患儿对疗程药物的反应会存在突出的个体相同之处，其主要理由有可能与复杂的异质普遍性、介导相同之处及多态普遍性有关。所以，逐步明晰SCLC的基因习特质对实现似乎本质上的SCLC核心内容疗规尤为不可或缺。多达期今后习者王洁等研究课题人员通过研究原理单细胞内基因脱氧核糖核酸意图对患儿单个CTC开展全都基因、核苷酸基因脱氧核糖核酸。

在此项研究课题中所，谢晓亮教授问世的多重淬火和亚胺周而复始的逐次技术技术开发(MAIBAC)，获得成功实现了对患儿外周屑单个CTC的全都基因逐次和深度脱氧核糖核酸，在单个细胞内水准探测全都基因基因拷贝数变异(CNVs)和单核苷酸变异(SNVs)o单细胞内水准CTCs基因脱氧核糖核酸技术技术开发可立刻给予如耐药基因突变等核心内容疗规所必需的不可或缺信息，同时也为未有来SCLC载体药物的技术开发给予技术技术开发支持。

SCLC有组织骨头难以给予，限制了后续各项检验和研究课题的开展，而利用CTCs构建的SCLC周而复始细胞内复刻瘤( CTC-derived explants，CDXs)模型，有望应对这一复杂化新问题。最多达，Hodgkinson等更加进一步将6同上ED-SCLC患儿lOml外周屑中所的CTCs提取后注射到免疫缺陷小鼠皮下，结果在4只小鼠身上形成了CDXs，推论SCLC患儿的CTCs具有致瘤普遍性。

同时研究原理CelISearch规扫描这6同上SCLC患儿的CTCs，%-获得成功形成CDXs的4同上患儿的CTCs计算皆>400个／7.5ml屑，而另外2同上未有形成CDXs的患儿其CTCs计算大致相同222和20个／7.5ml屑，提醒SCLC的CTCs致瘤普遍性与外周屑CTCs教量有关。进一步研究见到相较于疗程诱发SCLC，疗程耐药普遍性SCLC患儿的CDXs倍增时间短、湿润更加短时间。对3同上CDXs给予顺铂和前沿泊苷疗程药物，其诱发依序为CDX3>CDX2>CDX4，相应患儿的OS大致相同9.7.3.5.0.9个年初，提醒对CDXs开展体内药敏检验可以间接反应会患儿穴居时间。

该研究课题显示部分SCLC的外周屑CTCs具有干细胞内特普遍性，可开展体内培养、形成与原发高度相同的CDXs，为SCLC患儿的体内药敏检验、耐药机制研究等一系列检验和研究课题给予了必需的有组织，应对了SCLC患儿骨头来源不足的疑虑。

论据

从现行的研究课题可以窥见，虽然CTCs在SCLC中所的医习研究原理仍处于揭示下一阶段，但前景广袤。目前，诸多产物普遍性研究课题正在开展中所，看来随着研究课题的不断深入，CTCs有望成SCLC的突破口，希望CTCs在SCLC的领域中所为我们助长惊喜。

编辑： 霜